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家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导人家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，需用__________酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2分)(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间；若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达，可分别采用__________、__________的方法逐步鉴定。(6分)(3)通过PCR技术可大量获取目的基因，该PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液(含M92十)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、__________和__________。(4分)(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反应器中，这样可以__________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。(3分)
参考答案
参考解析
解析：(1)胰蛋白
(2)分子杂交：抗原一抗体结合
(3)耐高温的DNA聚合酶(taq酶)；DNA引物
(4)增大表面积
解析：
(1)动物细胞培养时，因动物组织细胞聚合在一起，需要用胰蛋白酶进行处理，水解组织中的蛋白质，以便获得单个细胞。
(2)基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录．可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻泽，可采用抗原一抗体杂交法。
(3)聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。采用PCR扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液(含M9“)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶(taq酶)和DNA引物。
(4)细胞增殖到一定程度，也就是互相挨在一起的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，这种现象就叫做接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反应器中．这样可以增大表面积，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
(2)分子杂交：抗原一抗体结合
(3)耐高温的DNA聚合酶(taq酶)；DNA引物
(4)增大表面积
解析：
(1)动物细胞培养时，因动物组织细胞聚合在一起，需要用胰蛋白酶进行处理，水解组织中的蛋白质，以便获得单个细胞。
(2)基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录．可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻泽，可采用抗原一抗体杂交法。
(3)聚合酶链式反应(PCR)是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。采用PCR扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液(含M9“)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶(taq酶)和DNA引物。
(4)细胞增殖到一定程度，也就是互相挨在一起的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，这种现象就叫做接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放人反应器中．这样可以增大表面积，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
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考题
家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
(1)进行转基因操作前，需用__________酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
(2分)
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自eDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间；若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达，可分别采用__________、__________的方法逐步鉴定。(6分)
(3)通过PCR技术可大量获取目的基因，该PCR反应体系的主要成分包含：扩增缓冲液
(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、__________和__________。(4分)
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以__________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。(3分)
考题
下列关于干扰素的有关叙述，正确的是（）A、干扰素是抗生素中的一种，是微生物代谢过程中形成的次级代谢产物B、基因工程生产干扰素，获取干扰素基因一般采用“鸟枪法”C、基因工程生产干扰素，通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细胞D、利用效应T淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞可大规模培养生产干扰素
考题
科学家将β-干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为（）A、基因工程B、蛋白质工程C、基因突变D、细胞工程
考题
作为基因的运输工具-运载体，必须具备的条件之一及理由是（）A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C、具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选
考题
下列能说明目的基因在受体细胞中完成了表达的是（）A、棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B、大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC、山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D、酵母菌细胞中提取到人干扰素
考题
利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（）A、棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B、大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC、山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D、酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
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科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是（）A、选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B、人的生长激素基因在小鼠中稳定遗传的关键是看其能否表达C、人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用D、将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代
考题
生物学家通过基因工程培育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白。操作步骤：从人的（）获取目的基因；目的基因与（）结合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入（）和终止子。然后把基因表达载体导入牛的（），通过发育形成的牛体细胞含人的（），成熟的牛产的的奶中含有（），证明基因操作成功。
考题
科学家将—干扰素基因进行定点突变导人大肠杆菌内表达，使干扰素第十七位的半胱氨酸，改变成丝氨酸，结果大大提高了—干扰素的抗病活性，并且提高了储存稳定性。该生物技术为（）A、基因工程B、蛋白质工程C、基因突变D、细胞工程
考题
基因工程中，构建基因表达载体时（）A、需要包含启动子、终止子、标记基因、目的基因等B、目的基因只能从目的生物中获取C、启动子将启动表达载体的复制D、剪切中形成的末端都可由T4DNA连接酶连接
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基因工程的操作步骤： ①使目的基因与运载体相结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④提取目的基因。 正确的操作顺序是（）A、③②④①B、②④①③C、④①②③D、③④①②
考题
干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性。请分析回答：获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家利用（）酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶（）的部位）等调控组件连接在一起，采用（）的方法将重组DNA导入牛的（）细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛。大大提高了干扰素的产量。
考题
转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤中分离出纤维细胞，进行体外培育。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：筛选转基因细胞时，需要利用基因表达载体中（）的作用。
考题
外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。A、②④①③⑤B、①②④③⑤C、②④③①⑤D、④②①③⑤
考题
下列有关细胞工程、发酵工程、基因工程说法错误的是（）。A、现代细胞工程就是对经过基因工程改造的组织进行细胞培养和细胞融合B、现代细胞工程不再是传统意义上组织培养技术C、现代发酵工程所采用的菌株是通过基因工程获得的高效表达菌株D、通过基因工程获得的高效表达菌株可能是微生物的产物、也可能产生于动植物基因，但不可能来自人的基因。
考题
单选题作为基因的运输工具-运载体，必须具备的条件之一及理由是（）A
能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B
具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C
具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D
能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选
考题
单选题外源基因表达的基本流程是（）。 ①重组表达载体导入宿主细胞； ②目的基因的获得； ③重组表达载体的筛选与认； ④目的基因与载体的重组； ⑤目的基因的表达。A
②④①③⑤B
①②④③⑤C
②④③①⑤D
④②①③⑤
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