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问答题
按适当的顺序，列出将一种 mRNA的 cDNA 克隆到表达载体所用到的酶。
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考题
cDNA合成及克隆的基本步骤包括用反转录酶合成cDNA第一链，聚合酶合成cDNA第二链，加入合成接头以及将双链DNA克隆到适当A、rDNAB、DNAC、载体（噬菌体或质粒）D、RNAE、dDNA
考题
下列关于cDNA文库的叙述中错误的是（ ）A.从特定组织或细胞中提取mRNA
B.将特定细胞的DNA用限制性内切核酸酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中
C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA
D.用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA
考题
DNA重组的顺序是（）①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。A、①②③④B、①④②③C、①③②④D、④①③②
考题
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。
为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。说明怎样处理载体和cDNA分子，才能把它们连接到一起。处理过的载体本身能自连吗？cDNA呢？
考题
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。
为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。载体和cDNA分子要经过怎样的处理才能提高产生重组DNA分子的效率？
考题
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。
为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。假定载体长为43kb，cDNA的平均长度是lkb，请估计在连接混合物中，载体分子同cDNA的比例是多少？
考题
问答题λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。
为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI（5’-C十TCGAG）进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC，它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA，构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。能够用XhoI从重组质粒中切出cDNA吗？
考题
单选题确切地讲，cDNA文库包含（）A
一种物种的全部mRNA信息B
一种物种的全部基因信息C
一种生物体组织或细胞的全部基因信息D
一种生物体组织或细胞的全部mRNA信息E
一种生物体或组织所表达的mRNA信息
考题
判断题在研究mRNA所包含的功能基因信息时，一般将其反转录成的cDNA，再插入到可以自我复制的载体中。A
对B
错
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