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问答题
DNA连接反应中的注意事项。
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考题
下列哪些因素对保证较高连接效率是有利的（）A、高纯度DNA。B、载体与目的基因摩尔数之比为1：1。C、载体与目的基因摩尔数之比为1：3~5。D、连接反应体系中DNA浓度较高。E、连接反应体系中DNA浓度较低。
考题
关于DNA复制中连接酶的叙述，错误的是（）。A、催化相邻的DNA片段以5’，3’-磷酸二酯键相连B、连接反应需要ATP或NAD+参与C、催化相邻的DNA片段以3’，5’—磷酸二酯键相连D、催化反应中首先与ATP生成中间体
考题
提高重组率的方法包括（I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间）（）A、I+IIB、I+II+IIIC、I+III+IVD、II+III+IV
考题
DNA复制时，复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制，（）链上是连续复制，（）链上是不连续合成的，即先合成出小的DNA片段，称为冈畸片段，然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量，细菌内以（）为能量来源，动物细胞和某些噬菌体以（）为能量来源。
考题
单选题关于DNA复制中连接酶的叙述错误的是（）A
参与随从链的生成B
连接双链中的单链缺口C
催化相邻的DNA片段以3′，5′－磷酸二酯键相连D
连接反应需要ATP参与E
催化相邻的DNA片段以5′，3′－磷酸二酯键相连
考题
单选题T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶（）。A
催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B
既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C
是一种单肽酶，分子量为74kDaD
既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接
考题
填空题平末端连接法（bluntendligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端DNA连接的效率。常用的凝聚剂是（）。
考题
单选题下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。A
连接反应的最佳温度为37℃B
连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C
连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD
接酶通常应过量2-5倍
考题
填空题DNA复制时，复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制，（）链上是连续复制，（）链上是不连续合成的，即先合成出小的DNA片段，称为冈畸片段，然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量，细菌内以（）为能量来源，动物细胞和某些噬菌体以（）为能量来源。
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