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9、凝胶过滤柱层析是根据()分离纯化蛋白质的。
A.蛋白质所带电荷
B.蛋白质分子大小
C.蛋白质吸附特性
D.蛋白质亲和特性
参考答案和解析
凝胶过滤层析又称分子筛层析、排阻层析、体积排阻层析等,是利用具有立体网状结构、且呈珠状颗粒的凝胶作为固定相,对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。 分离和纯化蛋白质的原理 如下: 1 ) 相对分子质量较大的蛋白质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的孔隙向前移动,速度快而首先流出层析柱,因此流程较短; 2 ) 相对分子质量较小的 蛋白质 由于直径小于凝胶网孔,可自由地进出凝胶颗粒的网孔,在向下移动过程中,从一个胶粒孔隙进入另一凝胶颗粒,移动速率慢而最后流出层析柱; 3)中等大小的 蛋白质 ,在凝胶颗粒内外均有分布,部分进入颗粒,从而在大分子 蛋白质 与小分子 蛋白质 之间被洗脱。
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考题
问答题凝胶过滤和SDS-PAGE 均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白质分子越小,迁移速度越快?
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