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免疫印迹条带太多,背景强度低于条带的原因是什么?有何解决的方案?
参考答案和解析
免疫印迹方法亦称 Western blot,由 SDS-PAGE、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋 白样品经 SDS 处理后带负电荷,SDS-PAGE 时从阴极向阳极泳动,分子量小者,泳动速度快;将凝胶中已经 分离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上;将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性 抗体和酶标第二抗体作用,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色;根据电泳时加入的分子量标准,可确定各组份的分子量。
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