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试述免疫印迹试验的基本原理及其技术要点。
参考答案和解析
免疫印迹法是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来一项检测蛋白质的技术,它将SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的特异性相结合,其操作可分成三个阶段:
第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE);第二阶段为电转移;第三阶段为酶免疫定位。
需注意问题:
①许多单克隆抗体不能与变性抗原反应,因此免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。
②在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩可提高免疫印迹的灵敏度。
③IBT法在临床应用中存在一定的局限性:不同分子量的蛋白质出现电泳距离一致的条带;IBT法一般不能检出针对构象依赖表位的抗体,造成某些抗体漏检。
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考题
酶免疫分析技术是临床免疫检验常用技术,主要包括ELISA,免疫印迹法,斑点酶免疫吸附试验,酶增强免疫测定技术和克隆酶供体免疫分析。针对不同的分析目的和要求,需要选择性使用分析技术。下面属于均相酶免疫测定的是A、酶增强免疫测定技术B、ELISAC、斑点酶免疫吸附试验D、亲和层析介导的免疫测定法E、免疫印迹法一般采用β-半乳糖苷酶作为标记酶的检测方法是A、亲和层析介导的免疫测定法B、免疫印迹法C、斑点酶免疫吸附试验D、克隆酶供体免疫分析E、ELISA
考题
酶免疫分析技术是临床免疫检验常用技术,主要包括ELISA,免疫印迹法,斑点酶免疫吸附试验,酶增强免疫测定技术和克隆酶供体免疫分析。针对不同的分析目的和要求,需要选择性使用分析技术。一般采用β-半乳糖苷酶作为标记酶的检测方法是()A、亲和层析介导的免疫测定法B、免疫印迹法C、斑点酶免疫吸附试验D、克隆酶供体免疫分析E、ELISA
考题
单选题酶免疫分析技术是临床免疫检验常用技术,主要包括ELISA,免疫印迹法,斑点酶免疫吸附试验,酶增强免疫测定技术和克隆酶供体免疫分析。针对不同的分析目的和要求,需要选择性使用分析技术。下面属于均相酶免疫测定的是()A
酶增强免疫测定技术B
ELISAC
斑点酶免疫吸附试验D
亲和层析介导的免疫测定法E
免疫印迹法
考题
单选题用胶体金标记技术和蛋白质层析技术结合的分析技术是()A
免疫渗滤试验B
免疫印迹法C
斑点酶免疫吸附试验D
酶联免疫斑点试验E
免疫层析试验
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