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酵母质粒载体的主要类型有()、()、()和()。
参考答案
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考题
载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为()A、黏粒载体B、人工染色体C、质粒载体D、噬菌体载体E、病毒载体
考题
问答题λYES(酵母—大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体,这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成,它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分,然后它能在体外被包装入病毒颗粒中,包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌,λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组,并进行独立复制,这就可以从质粒中分离出来,以便进行进一步的遗传操作。
为了最大限度地提高克隆效率,载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶XhoI(5’-C十TCGAG)进行切割,然后在dTTP存在的情况下,同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来,这两段寡聚核苷酸的序列是:5’—CGAGATTTACC和5’—GGTAAATC,它们的5’端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2μg的7载体和0.1μg的cDNA,构建了一个有4×10个克隆的cDNA文库。能够用XhoI从重组质粒中切出cDNA吗?
考题
单选题下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?()A
质粒B
黏粒C
酵母人工染色体(YAC)D
λ噬菌体
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