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科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)细胞进行复制和表达,如下图。所使用的质粒中有和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。

(1)将蜂鸟的B-球蛋白基因导人大肠杆菌,需要先用______(相同/不同)的限制性内切酶处理蜂鸟的DNA和载体质粒,在用________酶进一步处理以得到重组质粒。(6分)

(2)在将重组质粒导人大肠杆菌细胞之前,需要用_______(填物质名称)处理大肠杆菌,使之转化为能够吸收周围环境中DNA分子的__________细胞。(6分)

(3)使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择________的菌落培养,就获得了导人重组质粒的大肠杆菌。(3分)


参考答案

参考解析
解析:(1)将蜂鸟的β-球蛋白基因导入大肠杆菌前,需先构建基因表达载体,即先用同种限制酶处理蜂鸟的DNA和质粒,并用DNA连接酶酶进一步处理以期得到重组质粒;

(2)将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法,即用Ca2+处理微生物细胞,使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态。

(3)质粒中有ampⅡ和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。在构建基因表达载体时,ampⅡ基因完好,而lacZ基因被破坏,因此使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择白色的菌落克隆培养,就获得了导入重组质粒的大肠杆菌。
更多 “科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)细胞进行复制和表达,如下图。所使用的质粒中有和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。 (1)将蜂鸟的B-球蛋白基因导人大肠杆菌,需要先用______(相同/不同)的限制性内切酶处理蜂鸟的DNA和载体质粒,在用________酶进一步处理以得到重组质粒。(6分) (2)在将重组质粒导人大肠杆菌细胞之前,需要用_______(填物质名称)处理大肠杆菌,使之转化为能够吸收周围环境中DNA分子的__________细胞。(6分) (3)使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择________的菌落培养,就获得了导人重组质粒的大肠杆菌。(3分)” 相关考题
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考题 对人类糖尿病的基因治疗研究大致步骤如下,由此可知() ①提取目的基因 ②将目的基因与质粒结合为重组质粒 ③将重组质粒导入大肠杆菌 ④重组质粒在菌体内增殖 ⑤分离重组质粒,提取目的基因 ⑥将目的基因与某种病毒结合为重组DNA ⑦将重组DNA导入人体有基因缺陷的细胞 ⑧目的基因的检测和表达A、过程①目的基因应来自患者本人B、过程④是为了修饰基因C、过程②、⑥在细胞内进行D、目的基因导入不同受体细胞目的不同

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考题 研究人员想将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内,以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗氨苄青霉素基因,且目的基因不插入到基因A、B中,而大肠杆菌不带有任何抗性基因。则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗生素首先应该()A、仅有链霉素B、仅有抗氨苄青霉素C、同时含链霉素和氨苄青霉素D、无链霉素和氨苄青霉素

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考题 为了减轻工程菌的代谢负荷,提高外源基因的表达水平,可以采取的措施有()A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制

考题 转基因技术流程的第三步为()。A、基因表达载体的构建B、目的基因的获取C、目的基因的检测和表达D、将目的基因导入受体细胞

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考题 单选题作为基因的运输工具-运载体,必须具备的条件之一及理由是()A 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B 具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达C 具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件D 能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选

考题 填空题在LacZ标记基因插入外源基因,经IPTG诱导,在X-gal培养基中显()色,为()性克隆,未插入基因的克隆显()色,为()性克隆。

考题 填空题在大肠杆菌表达系统中表达真核细胞基因,目的基因必须是(),因为大肠杆菌没有剪切()的功能。