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试述农杆菌Ti质粒基因转化的原理。
参考答案
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考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
下列有关根瘤农杆菌的说法不正确的是:()A、根瘤农杆菌可侵染植物细胞并诱发产生根瘤B、Ti质粒位于根瘤农杆菌染色体内C、Ti质粒是双链环状DNA分子D、T-DNA可以从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞中
考题
关于转基因操作的过程,正确的顺序是:() ①目的基因插入Ti质粒的T-DNA中 ②农杆菌侵染植物伤口并进入细胞 ③重组质粒导入到农杆菌,T-DNA插入植物基因组中 ④遗传特性在受体植物中表达 A、①②④③B、①②③④C、①③④②D、①③②④
考题
植物被野生型农杆菌感染后会产生瘤状结构(类似愈伤组织),主要原因是农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因、细胞分裂素合成基因和冠瘿碱合成基因。冠瘿碱是农杆菌生命活动必需的有机物质,而植物自身不能合成和利用。下列叙述错误的是()A、去除生长素合成基因,瘤状结构会生出许多根B、去除冠瘿碱合成基因,农杆菌在被感染植物体内不能大量繁殖C、去除生长素合成基因和细胞分裂素合成基因,不会产生明显的瘤状结构D、为获得正常生长的转基因植物,应去除Ti质粒中的上述3种基因
考题
在将目的基因导入受体细胞的相关操作中,不正确的是()A、导入双子叶植物细胞时常采用农杆菌转化法B、使用的运载体有质粒、噬菌体衍生物和动植物病毒等C、导入动物细胞时常采用显微注射法D、目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变
考题
农杆菌介导法是植物基因转化的最为普遍的方法,它的基本步骤包括()。 ①将有切口的叶片小块浸入农杆菌菌液中 ②利用重组Ti质粒转化农杆菌 ③向改造后的Ti质粒中插入外源目的基因 ④对天然Ti质粒进行改造 ⑤将被农杆菌侵染的叶片在培养基上培养请排出正确顺序A、①③④②⑤B、④③②①⑤C、①④②③⑤D、②④①③⑤
考题
单选题关于转基因操作的过程,正确的顺序是:() ①目的基因插入Ti质粒的T-DNA中 ②农杆菌侵染植物伤口并进入细胞 ③重组质粒导入到农杆菌,T-DNA插入植物基因组中 ④遗传特性在受体植物中表达A
①②④③B
①②③④C
①③④②D
①③②④
考题
单选题下列关于农杆菌Ti质粒的叙述哪一个是错误的?()A
它存在于根癌农杆菌细胞内B
该质粒上的T-DNA片段能够被整合进植物细胞染色体C
它的T-DNA片段上含有参与植物生长激素和冠瘿碱合成的基因D
它存在于所有的土壤农杆菌细胞内
考题
单选题下列有关根瘤农杆菌的说法不正确的是:()A
根瘤农杆菌可侵染植物细胞并诱发产生根瘤B
Ti质粒位于根瘤农杆菌染色体内C
Ti质粒是双链环状DNA分子D
T-DNA可以从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞中
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