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以下哪项不是单向免疫扩散法出现误差的原因

A、抗原或标准溶液溢出加样孔

B、扩散时湿盒不平，导致沉淀环不圆

C、大分子抗原和长时间扩散(>48小时)的结果处理用Mancini曲线

D、加样孔破损

E、琼脂板内水分蒸发

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