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提高PCR反应的特异性一般可以使用哪几种方法?
参考答案
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考题
关于PCR技术的扩展,下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物,同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率,但PCR特异性降低C、利用反向PCR,可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR,可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列,这种PCR常用于细菌学鉴定,确定同一种细菌的不同种类
考题
以下关于梅毒螺旋体核酸检测-聚合酶链反应(PCR)的认识,错误的是()。
A、PCR检测TP DNA,特异性很强,敏感性很高B、当前诊断梅毒的PCR仍存在引物的非特异性、对血清(全血)、CSF等敏感度低C、PCR检测可作为判愈检测D、PCR方法易受标本中的组织和细胞碎片等物质抑制E、当皮损开始愈合分泌物减少,血清学试验阳性反应时,采用PCR方法不合适
考题
Mg2+在PCR反应中的作用,错误的是( )A、提高TaqDNA聚合酶活性B、稳定PCR反应体系C、当dNTP的浓度为200nmol/L时,MgCl2浓度一般为1.5mmol/L较合适D、在PCR中发挥作用的是结合Mg2+E、Mg2+浓度过低使酶活力升高,还会使酶催化非特异性扩增
考题
实时荧光定量RT-PCR是()。A、可以实现初始模板拷贝数的定量B、SYBR GreenⅠ特异性强C、原理利用了临界点循环D、利用PCR最终产物量高低进行定量E、特异的分子信标探针可以提高定量的准确性
考题
在进行DNA重组实验中,首先要获得目的基因,一般不使用下面哪种方法()。A、从细胞内部总DNA提取分离目的基因B、构建基因文库,从中调取目的基因C、以mRNA为模板,逆转录合成互补的DNA片段D、利用PCR特异性地扩增所需要的目的基因
考题
多选题实时荧光定量RT-PCR是()。A可以实现初始模板拷贝数的定量BSYBR GreenⅠ特异性强C原理利用了临界点循环D利用PCR最终产物量高低进行定量E特异的分子信标探针可以提高定量的准确性
考题
问答题什么是PCR,有什么特点,扩增反应有哪几个步骤?
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