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抗生素抗性、插入失活、α互补都可以作为筛选标记对目的基因克隆进行筛选。
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考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
如果克隆的基因能够在宿主菌中表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那我们可以( )。A.利用营养突变株进行筛选
B.通过α互补进行蓝白筛选
C.利用营养完全株进行筛选
D.免疫组化筛选
E.抗药性标志
考题
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选
考题
转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤中分离出纤维细胞,进行体外培育。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着,将重组胚胎移入代孕母猪体内,最终获得转基因克隆猪。请回答:筛选转基因细胞时,需要利用基因表达载体中()的作用。
考题
单选题如果克隆的基因能够在宿主菌中表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那我们可以( )。A
利用营养突变株进行筛选B
通过α互补进行蓝白筛选C
利用营养完全株进行筛选D
免疫组化筛选E
抗药性标志
考题
单选题重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A
标志补救筛选B
插入表达筛选C
抗性筛选D
限制性内切酶酶切图谱分析E
核酸分子杂交筛选
考题
单选题如果你想使用古菌作为宿主细胞表达外源基因,那么你需要使用抗生素抗性标记以便进行筛选。你认为适合作为古菌抗性标记的抗生素应该是()A
青霉素B
氯霉素C
四环素D
嘌呤霉素
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