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1.简述淋巴细胞杂交瘤的制备过程。 2.为什么可以利用HAT培养基筛选出杂交瘤细胞？
参考答案和解析
答：（1）淋巴细胞杂交瘤的定义 淋巴细胞杂交瘤又称杂交瘤，是指由 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两者融合而成的一种既能在体内外大量增殖，又能产生大量 McAb 的杂种细胞。 （2）制备淋巴细胞杂交瘤的步骤 ①选择亲本细胞株 a.第一种亲本细胞——骨髓瘤细胞，必须事先选择 HGPRT 酶缺陷型细胞或 TK 酶缺陷型细胞，因前者不能利用外源性次黄嘌呤来合成本身核酸中所需要的嘌呤，而内源性嘌呤和嘧啶的合成，又被 Apr（氨基蝶呤）所阻断，故在 HAT 培养基上会死亡；而后者可阻断 dTMP 的合成，故也可使亲本骨髓瘤细胞因不能在 HAT 上合成核酸而死亡。 b.第二种亲本细胞——B 淋巴细胞，是用 SRBC 先免疫小白鼠，待其在脾内形成激活的 B 淋巴细胞后，取出脾脏，制成B淋巴细胞悬液。 ②混合双亲细胞 将 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞以 2:1 至 10:1 比例混合。 ③促进细胞融合 早期用仙台病毒，近年来都用 PEG 作融合剂。 ④淘汰未融合的亲本细胞 把经融合剂处理后的细胞分装到塑料板孔内，在 HAT 选择性培养液中培养两周左右，未经融合的亲本细胞因无法合成核酸而死亡。杂交后的融合子经过产物的鉴定，选出优良的 McAb 产生株。 ⑤杂交瘤的扩大培养 优良淋巴细胞杂交瘤细胞株的大量培养：可将它们注射到动物体内去增殖，也可在组织培养瓶或新型的细胞培养罐中进行大量培养。 （3）淋巴细胞杂交瘤的应用 用于单克隆抗体的制备。
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考题
不属于杂交瘤技术制备McAb的基本原理的是A．淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说B．杂交瘤保持双方亲代细胞的特性C．利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞D．采用转基因技术E．杂交瘤细胞可以无限增殖
考题
下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是（）A、制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养B、需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞C、利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞D、需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞
考题
下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（）A、制备过程中不需要动物细胞培养技术B、杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点C、经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产D、单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂
考题
下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤： ①获取骨髓瘤细胞和能产生抗X抗体的B淋巴细胞： ②将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养； ③筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞； ④利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞： ⑤从腹水中提取抗体； ⑥利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合。 以下对单克隆抗体制备的相关叙述中错误的是（）A、实验顺序应当是①⑥④③②⑤B、②产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆C、⑥过程获得的细胞均可无限增殖D、该过程产生的抗X抗体特异性强、灵敏度高
考题
单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞A、②④B、①③⑤C、①②③④D、②③
考题
单选题在杂交瘤制备中，单克隆抗体的特异性取决于（ ）。A
抗原的纯化B
融合细胞的选择C
在HAT培养基中培养D
有限稀释法使杂交瘤细胞克隆化E
生长在培养基中细胞的抗原刺激
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