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1. 涂片后为什么必须进行固定？固定时应注意什么？ 2. 要做好革兰染色，应注意哪些关键步骤？为什么？ 3. 使用油镜时应注意哪些问题？

参考答案和解析
a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b增加其对染料的亲和力。固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。
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