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1、简述碱变性法提取质粒DNA的基本原理
参考答案和解析
\r\n\t用碱变性抽提质粒DNA的技术是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。先用pH 12.6的NaOH溶液处理细胞,染色体DNA氢键断裂,双螺旋结构打开变性,质粒DNA大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的双链不会完全分离,当用pH 4.8的NaAc高盐缓冲液调节pH至中性时,变性的质粒DNA将恢复原来的双螺旋结构,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性,形成了缠绕的网状结构,通过离心,染色体DNA与蛋白质等一起沉淀而被除去,溶液中只有双链的质粒DNA,再用乙醇或异丙醇把质粒DNA沉淀出来,制备出质粒DNA。\r\n
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考题
下列对细菌质粒生物学特性叙述正确的是A:质粒DNA复制为自主复制B:质粒DNA复制为非自主复制C:质粒是细菌生命活动不可缺少的物质D:细菌内结构相似的质粒都能稳定共存E:质粒DNA不能复制
考题
对人类糖尿病的基因治疗研究大致步骤如下,由此可知() ①提取目的基因 ②将目的基因与质粒结合为重组质粒 ③将重组质粒导入大肠杆菌 ④重组质粒在菌体内增殖 ⑤分离重组质粒,提取目的基因 ⑥将目的基因与某种病毒结合为重组DNA ⑦将重组DNA导入人体有基因缺陷的细胞 ⑧目的基因的检测和表达A、过程①目的基因应来自患者本人B、过程④是为了修饰基因C、过程②、⑥在细胞内进行D、目的基因导入不同受体细胞目的不同
考题
在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指()A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B、噬菌体、质粒、DNA连接酶C、DNA限制酶、RNA连接酶、质粒D、DNA限制酶、DNA连接酶、质粒
考题
多选题质粒的结构特点有()A以环状双链DNA分子存在B质粒DNA有超螺旋结构C以环状单链DNA分子存在D质粒DNA有半开环结构E以环状双链RNA分子存在F质粒DNA有线性结构G以线性双链DNA分子存在
考题
问答题试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。
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