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问答题
某一质粒载体具有 Tetr和 Kanr的表型,在 Kan抗性基因内有一 Bgl I的切点。现用 Bgl I切割该载体进行基因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
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考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNAC.除质粒外,λ噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
根据基因工程的有关知识,回答下列问题:质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是()。
考题
对理想的克隆载体特性的叙述,错误的是()。A、分子量小、多拷贝、紧密控制型B、具有多种常用的限制性内切酶的单切点C、能插入较大的外源DNA片段D、具有容易操作的检测表型E、常用的质粒载体大小一般在1~10kb
考题
下列关于载体的叙述中,错误的是()A、与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子B、对某种限制酶而言,最好只有一个切点,但还要有其他多种限制酶的切点C、目前常用的有质粒、噬菌体和动、植物病毒等D、具有某些标记基因,便于对其进行切割
考题
下列有关基因工程中载体的说法正确的是()A、质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子B、所有的质粒都可以作为基因工程中的载体C、质粒载体的复制和表达不遵循中心法则D、作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
考题
下列有关基因工程中运载体的说法,正确的是()A、在进行基因工程的操作中,作为运载体的质粒都是天然质粒B、所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体C、质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子D、作为运载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA分子进行鉴定和选择的标记基因
考题
以下说法正确的是()A、所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D、基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
考题
下列说法正确的是()A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D、基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
考题
问答题在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。
如果用克隆在另一个与pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行Southern印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?
考题
单选题下列关于质粒pBR322DNA的叙述哪一个是错误的?()A
它的分子量较小,易于进入细胞B
含有抗四环素(TetR)和抗氨苄青霉素(AmpR)的基因C
若用EcoRI切割该质粒,不破坏它的两个抗生素抗性基因D
用BamHI限制酶切割pBR322质粒,将破坏它的抗氨苄青霉素基因
考题
单选题下列载体哪一个是一种天然的极好的基因工程载体()A
质粒B
黏性质粒载体C
Ti质粒D
噬菌体载体
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