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单选题
在进行蓝-白筛选时,pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA,转化细菌后,含有插入了外源DNA的重组质粒的()。
A
细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长
B
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑
C
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑
D
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑
E
无菌落形成
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考题
载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。载体必须具备的特性中不包括A、具备自我复制的能力,有较高的拷贝数B、载体必须具有一个或多个筛选标志C、能容纳外源性的DNA分子D、具备一个或多个限制性内切酶的单一识别和切割点E、必须能够表达外源基因人工构建的含有噬菌体DNA cos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为A、黏粒载体B、人工染色体C、质粒载体D、噬菌体载体E、病毒载体
考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNAC.除质粒外,λ噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
克隆质粒载体的基本组成有A.含有可利用宿主细胞复制系统复制起始的区域
B.含有一个或多个抗性基因的表达区域
C.含有用于外源基因的DNA限制性内切酶作用位点
D.含有多克隆位点
E.克隆质粒利用自身的复制酶系统,对外源基因进行扩增
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
在进行蓝-白筛选时,pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA,转化细菌后,含有插入了外源DNA的重组质粒的()。A、细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长B、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑C、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑D、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑E、无菌落形成
考题
载体质粒pBR325共有三个选择性标记:Apr、Tcr、Cmr。它们分别含有一个单一酶切位点:PstI、SphI和EcoRI。若将一外源基因取代此载体上不含Cmr标记基因的PstI-SphI限制性DNA片段,那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是()A、ApB、TcC、CmD、Ap+TcE、Ap+Cm
考题
关于多克隆位点描述不正确的是()。A、用于插入外源基因的多种DNA限制性内切酶作用位点B、该位点既可位于抗性基因区域外,也可位于抗性基因区域内C、仅位于质粒载体中D、可能位于标记基因的区域内
考题
DNA重组的顺序是()①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。A、①②③④B、①④②③C、①③②④D、④①③②
考题
外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同,其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同,而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法,称作()。A、电转化重组DNA技术B、共转化重组DNA技术C、体外包装转染重组DNA技术D、脂质体导入重组DNA技术
考题
单选题将一段外源DNA插入到PBR322的BamHI位点,转化后,阳性重组体的筛选标记是()。A
氨苄青毒素抗性(Ampr)和四环素抗性(Tetr)B
Ampr,TetsC
Amps,TetrD
Amps,Tets
考题
单选题外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同,其重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不同,而将外源基因与报告基因共同导入感受态宿主细胞的方法,称作()。A
电转化重组DNA技术B
共转化重组DNA技术C
体外包装转染重组DNA技术D
脂质体导入重组DNA技术
考题
单选题DNA重组通常包括如下五个步骤: ⑴获得需要的目的基因(外源基因)。 ⑵用重组DNA分子(重组质粒)转化受体细胞,使之进入受体细胞并能够在受体细胞内复制和遗传。 ⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等,最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。 ⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用,形成重组DNA分子,并对其加以克隆和筛选。 ⑸对获得外源基因的受体细胞(转化子)进行筛选和鉴定。 上述五个步骤按通常的操作技术应依()顺序进行。A
⑴、⑵⑶、⑷、⑸B
⑴、⑵⑸、⑷、⑶C
⑴、⑷⑵、⑸、⑶D
⑴、⑵⑸、⑶、⑷
考题
单选题DNA重组的顺序是()①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。A
①②③④B
①④②③C
①③②④D
④①③②
考题
单选题关于DNA克隆的叙述,不正确的是( )。A
目的基因的获取B
外源基因和载体连接C
将重组DNA导入受体菌D
筛选出含有目的基因的转化菌E
常用到DNA解链酶
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