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问答题
如何以大肠杆菌质粒 DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因,并使之在大肠杆菌中进行表达?简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。
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考题
科学家为了研究一种蜂鸟β-球蛋白基因的功能,将该基因导人到大肠杆菌(菌落为白色)细胞进行复制和表达,如下图。所使用的质粒中有和lacZ两种标记基因,前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力,后者表达的半乳糖苷酶会使一种被称为X-gal的物质呈现蓝色。
(1)将蜂鸟的B-球蛋白基因导人大肠杆菌,需要先用______(相同/不同)的限制性内切酶处理蜂鸟的DNA和载体质粒,在用________酶进一步处理以得到重组质粒。(6分)
(2)在将重组质粒导人大肠杆菌细胞之前,需要用_______(填物质名称)处理大肠杆菌,使之转化为能够吸收周围环境中DNA分子的__________细胞。(6分)
(3)使用添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基培养经上述处理的大肠杆菌,选择________的菌落培养,就获得了导人重组质粒的大肠杆菌。(3分)
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
下列有关基因表达的叙述中,正确的是( )。A.哺乳动物红细胞中的基因不能表达
B.大肠杆菌质粒基因表达与核糖体无关
C.菠菜根尖细胞基因表达场所包括线粒、叶绿体
D.人甲状腺细胞生长激素基因处于关闭状态
考题
1976年人类首次获得转基因生物,即将人的生长激素抑制因子的基因转入大肠杆菌,并获得表达。这里的表达是指该基因在大肠杆菌内()A、能进行DNA复制B、能进行转录和复制C、能合成人的生长激素D、能合成抑制生长激素释放因子
考题
在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指()A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B、噬菌体、质粒、DNA连接酶C、限制酶、RNA连接酶、质粒D、限制酶、DNA连接酶、质粒
考题
用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是()A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
考题
利用转基因大肠杆菌可合成人体的蛋白质。下列叙述不正确的是()A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B、DNA连接酶和DNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
考题
用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是()A、通常用相同的限制性内切酶处理含目的基因的DNA和质粒B、DNA连接酶和RNA聚合酶是构建基因表达载体必需的工具酶C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了含抗生素抗性基因的表达载体D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
考题
在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指()A、大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B、噬菌体、质粒、DNA连接酶C、DNA限制酶、RNA连接酶、质粒D、DNA限制酶、DNA连接酶、质粒
考题
单选题在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指()A
大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B
噬菌体、质粒、DNA连接酶C
DNA限制酶、RNA连接酶、质粒D
DNA限制酶、DNA连接酶、质粒
考题
单选题下列关于克隆载体质粒的叙述哪一个是错误的?()A
质粒是细菌染色体外的遗传因子,一般为双链环状的DNA分子B
质粒在细胞内能自主地进行复制C
质粒上都有产生大肠杆菌素的基因D
通过“转化”,质粒进入细胞后,能使受体菌获得新的遗传特性
考题
单选题用于基因工程的克隆载体不包括( )。A
质粒DNAB
噬菌体DNAC
大肠杆菌染色体DNAD
逆转录病毒DNAE
人工合成DNA
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