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荧光定量PCR结果中样品的Ct值受下列哪些因素的影响（）。
- A、阈值设定
- B、模版的起始浓度
- C、PCR反应的循环数
- D、引物的扩增效率
参考答案
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考题
荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。荧光定量PCR方法中不是基于FRET原理设计的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法检测原理利用了Taq酶5′→3′外切酶活性的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法荧光定量PCR方法中最容易出现假阳性的是A、双链DNA染料结合法B、水解探针法C、分子信标法D、杂交探针法E、荧光标记引物法与常规PCR相比，荧光定量PCR的缺陷是A、定量仅根据指数扩增期B、灵敏性太高C、降低了携带污染D、无法检测扩增子大小E、增加了实验室污染的概率关于外标法荧光定量PCR错误的是A、为了定量准确，外标法标准曲线需要5个点以上，还需设阴性对照和阳性对照B、被检标本与标准品扩增效率之间的不一致会影响定量准确性C、是目前临床实验室应用最广泛的一种方法D、DNA标准品常是含有待测基因的一定浓度的质粒E、对于RNA病原体，标准品通常是一定浓度的RNA
考题
关于PCR技术的扩展，下列叙述错误的是A、多重PCR是在一次反应中加入多种引物，同时扩增一份DNA样品中的不同序列B、筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率，但PCR特异性降低C、利用反向PCR，可以扩增已知序列区间以外的序列D、利用不对称PCR，可以获得大量单链DNAE、共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列，这种PCR常用于细菌学鉴定，确定同一种细菌的不同种类
考题
下列关于Ct值的叙述，错误的是A、是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数B、可以根据Ct值的大小估计模板的初始量C、Ct值大小与模板量呈正比，Ct值越大，模板量越多D、是定量PCR外参照系统中重要的参数E、Ct值大小与模板量呈反比，Ct值越小，模板量越多
考题
以下关于PCR的说法错误的是（）A、PCR反应必须要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶B、应用PCR技术可以进行定点突变C、PCR的引物必须完全和模板互补配对D、PCR反应中，仅介于两引物间的DNA片段得到大量扩增
考题
实时荧光定量PCR检测HCV-RNA，室间质评的5个样本定量结果均低于靶值。根据上述信息，当前首要考虑的原因是（）A、样品的保存和处理B、PCR扩增条件C、试剂的效期D、交叉污染E、实验室环境
考题
关于关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A、增加镁离子浓度容易产生正向突变B、第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链C、第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链D、第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增E、该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
考题
关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A、只能在DNA片段的特定部位产生突变B、不需要测序确定突变结果C、重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D、大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E、重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A、第一轮PCR扩增的是同一条DNA模版链B、第二轮PCR扩增的不是同一条DNA模板链C、需要RNA作为引物D、一定要使用TaqDNA高保真酶进行扩增E、最后一轮PCR不需引物即可进行扩增
考题
单选题关于重组PCR定点突变和大引物突变法的叙述正确的是（）A
只能在DNA片段的特定部位产生突变B
不需要测序确定突变结果C
重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应D
大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应E
重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
考题
多选题关于关于重组PCR定点突变法叙述正确的是（）A增加镁离子浓度容易产生正向突变B第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链C第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链D第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增E该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
考题
单选题下列关于Ct值的叙述，错误的是（）A
是扩增曲线与荧光本底基线的交叉点处相应的反应循环数B
可以根据Ct值的大小估计模板的初始量C
Ct值大小与模板量呈正比，Ct值越大，模板量越多D
是定量PCR外参照系统中重要的参数E
Ct值大小与模板量呈反比，Ct值越小，模板量越多
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