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根据抗生素抗性基因插入失活原理,进行TetRAmpS 转化子的筛选时,应利用限制性内切酶进行 含抗生素抗药基因的质粒-pBR322哪个部位的切割?()
A.四环素抗性基因
B.氨苄青霉素抗性基因
C.氯霉素抗性基因
D.以上均可
参考答案和解析
导致目的基因失活
更多 “根据抗生素抗性基因插入失活原理,进行TetRAmpS 转化子的筛选时,应利用限制性内切酶进行 含抗生素抗药基因的质粒-pBR322哪个部位的切割?()A.四环素抗性基因B.氨苄青霉素抗性基因C.氯霉素抗性基因D.以上均可” 相关考题
考题
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是A、磷酸钙共沉淀法B、脂质体法C、显微注射法D、噬菌体感染E、氯化钙法重组DNA技术中最常用的筛选方法是A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选
考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子S
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNAC.除质粒外,入噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNAC.除质粒外,λ噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
如果克隆的基因能够在宿主菌中表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那我们可以( )。A.利用营养突变株进行筛选
B.通过α互补进行蓝白筛选
C.利用营养完全株进行筛选
D.免疫组化筛选
E.抗药性标志
考题
根据基因工程的有关知识,回答下列问题:质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:AATTC……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是()。
考题
下列有关基因工程操作的叙述正确的是()A、用同种限制性内切酶切割运载体与目的基因可获得相同的黏性末端B、以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C、检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D、用含抗生素抗性基因的质粒作为运载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
考题
人们常选用细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A、提高受体细胞在自然环境中的耐药性B、有利于对目的基因是否导入受体细胞进行检测C、增加质粒分子的分子量D、便于与外源基因连接
考题
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A、标志补救筛选B、插入表达筛选C、抗性筛选D、限制性内切酶酶切图谱分析E、核酸分子杂交筛选
考题
下列有关基因工程中载体的说法正确的是()A、质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DNA分子B、所有的质粒都可以作为基因工程中的载体C、质粒载体的复制和表达不遵循中心法则D、作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
考题
用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是()A、常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
考题
下列关于基因工程的叙述,正确的是()A、抗棉铃虫的抗性基因来自大肠杆菌B、限制酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列D、质粒上的抗生素抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞
考题
人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A、便于与外源基因连接B、有利于对目的基因是否导入进行检测C、增加质粒分子的分子量D、提高受体细胞在自然环境中的耐药性
考题
基因工程的叙述,正确的是()A、基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B、细菌质粒是基因工程常用的运载体C、通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种限制酶处理运载体DNAD、为育成抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体
考题
用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述错误的是()A、通常用相同的限制性内切酶处理含目的基因的DNA和质粒B、DNA连接酶和RNA聚合酶是构建基因表达载体必需的工具酶C、可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了含抗生素抗性基因的表达载体D、导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
考题
人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是()A、提高受体细胞在自然环境中的耐药性B、有利于对目的基因是否导入进行检测C、增加质粒分子在受体细胞存活的机会D、便于与外源基因连接
考题
单选题如果克隆的基因能够在宿主菌中表达,且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补,那我们可以( )。A
利用营养突变株进行筛选B
通过α互补进行蓝白筛选C
利用营养完全株进行筛选D
免疫组化筛选E
抗药性标志
考题
单选题重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括:分(目的基因的分离)、切(限制性内切酶切割目的基因和载体)、接(目的基因和载体连接)、转(连接产物导入受体细胞)、筛(筛选阳性重组子)。重组DNA技术中最常用的筛选方法是()A
标志补救筛选B
插入表达筛选C
抗性筛选D
限制性内切酶酶切图谱分析E
核酸分子杂交筛选
考题
问答题某一质粒载体具有Tetr和Kanr的表型,在Kan抗性基因内有一BglI的切点。现用BglI切割该载体进行基因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
考题
单选题下列关于质粒pBR322DNA的叙述哪一个是错误的?()A
它的分子量较小,易于进入细胞B
含有抗四环素(TetR)和抗氨苄青霉素(AmpR)的基因C
若用EcoRI切割该质粒,不破坏它的两个抗生素抗性基因D
用BamHI限制酶切割pBR322质粒,将破坏它的抗氨苄青霉素基因
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