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在进行蓝-白斑筛选时,重组质粒转化子(AmpR )培养基上 LB + Amp + X-gal + IPTG的生长状况()
A.生长,菌落为蓝色
B.生长,菌落为白色
C.生长,菌落为黑色
D.由于抗性基因失活,无菌落生长
参考答案和解析
PCR法?酶切法?测序
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考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子S
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNAC.除质粒外,入噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNAC.除质粒外,λ噬菌体可作为重组DNA的载体D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合
考题
某一质粒载体如图6所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活
(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH I酶切后,与用BamH I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述三种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是____;并且含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是____。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有____的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____。
考题
在进行蓝-白筛选时,pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA,转化细菌后,含有插入了外源DNA的重组质粒的()。A、细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长B、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑C、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑D、细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑E、无菌落形成
考题
若某质粒带有lacZ标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入()A、葡萄糖B、蔗糖C、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)D、异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)
考题
为了减轻工程菌的代谢负荷,提高外源基因的表达水平,可以采取的措施有()A、将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达。C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的复制。D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制
考题
将一段外源DNA插入到PBR322的BamHI位点,转化后,阳性重组体的筛选标记是()。A、氨苄青毒素抗性(Ampr)和四环素抗性(Tetr)B、Ampr,TetsC、Amps,TetrD、Amps,Tets
考题
若某质粒带有lacZ标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入()A、半乳糖B、葡萄糖C、蔗糖D、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)E、异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)
考题
单选题关于蓝白斑筛选,叙述错误的是()A
又称α-互补筛选B
含有重组质粒的细菌形成白色菌落C
含有重组质粒的细菌形成蓝色菌落D
带有“空”质粒的细菌形成蓝色菌落E
不含质粒的细菌不能生长
考题
单选题在进行蓝-白筛选时,pUC载体的lacZ基因位点插入外源DNA,转化细菌后,含有插入了外源DNA的重组质粒的()。A
细菌不能在含氨苄青霉素的培养板上生长B
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成白色菌斑C
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成蓝色菌斑D
细菌在含有X-gal和诱导剂IPTG的琼脂培养板上形成透明的无色菌斑E
无菌落形成
考题
单选题关于噬菌斑筛选法的原理,下面哪一种说法不正确?()A
噬菌斑颜色变化B
cⅠ基因失活造成的噬菌斑的变化C
对IPTG的分解能力D
对X-gal的分解与否
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